تعیین جایگاه سلولی پروتئین انکسین anxc3.1)c3.1) و تاثیر بیان بیش از حد آن بر روی رشد و ترشح پروتئین در آسپرژیلوس نیجر

روش بررسی: در این مطالعه تجربی، ژن انکسین c3.1 با استفاده از روش (polymerase chan reaction)pcr از روی dna ژنومی قارچ آسپرژیلوس نیجر تکثیر و پس از تأئید صحت توالی، در ساخت دو سازه ژنی قابل القاء به کار گرفته شد. در سازه اول، انکسین به صورت ممزوج با gfp(green fluorescent protein) و تحت کنترل پروموتور گلوکوآمیلاز در ناقل بیانی pgem-egfp و در سازه دوم، ژن مذکور تحت کنترل پروموتور سلوبیوهیدرولاز در ناقل بیانی pmjb کلون گردید. این سازه ها با استفاده از روش استاندارد ترانسفورماسیون قارچ ها به سویه آسپرژیلوس نیجر n402 وارد شدند. بیان هر یک از سازه ها با استفاده از منبع کربنی القاءکننده، القاء و تأثیر بیان بیش از حد ژن انکسین بر روی رشد شعاعی سویه های ترانسفورمنت و میزان ترشح پروتئین توسط آن ها بررسی گردید. مقایسه میانگین سرعت رشد شعاعی و میانگین میزان ترشح پروتئین سویه های ترانسفورمنت با میانگین های مربوطه در سویه وحشی با استفاده از آزمون t انجام پذیرفت. جایگاه سلولی انکسین در سویه ترانسفورمنتی که پروتئین ممزوج با gfp را بیان می نمود، با استفاده از میکروسکوپ فلئورسنت تعیین گردید.

یافته ها: اثر بیان بیش از حد ژن انکسین c3.1 بر روی سرعت رشد و ترشح پروتئین در آسپرژیلوس نیجر بررسی گردید. مقایسه میان گین سرعت رشد شعاعی و میزان ترشح پروتئین سویه های ترانسفورمنت با سویه وحشی، تفاوت معنی داری را نشان نداد (α<0.05). مطالعه ی میکروسکوپی سویه ی بیان کننده پروتئین ممزوج انکسینgfp- نشان داد که انکسین یک پروتئین سیتوزولی است که در سراسر هیف قارچی منتشر می باشد.