بررسی و مقایسه روش های استخراج dna از نمونه خون و اسلایدهای مغز استخوان و خون محیطی

مقدمه: روش های استخراج dna برای انجام تحقیقات ژنتیک و همین طور آزمایشات تشخیص طبی جهت بیماری هایی که منشاء ژنتیک دارند حائز اهمیت است.  هم چنین در مورد سرطان ها استفاده از روش های استخراج dna و بررسی ژنی در طول مراحل درمان، بعنوان یکی از روشهای آزمایشگاهی مطرح می باشد.حال بررسی آنکه کدام روش استخراج dna و استخراج از چه نمونه ای بهترین نتیجه را می دهد بسیار مهم خواهد بود.

روش بررسی: در این تحقیق از 5 نمونه مختلف شامل 1- خون 2-اسلاید مغز استخوان آرشیوی رنگ شده به روش گیمسا 3-اسلاید خون محیطی آرشیوی رنگ شده به روش گیمسا 4- اسلاید خون محیطی تازه رنگ شده به روش گیمسا و 5-اسلاید خون محیطی رنگ نشده، به سه روش 1- نمک زدن 2-جوشاندن و 3-فنل- کلروفرم، dna استخراج شد. در این تحقیق سه پارامتر کیفیت (optimal density:od)، کمیت (غلظت (dna و بازدهی یا و ضعیت pcr:polymerase chain reaction مورد بررسی قرار گرفت.

نتایج: بهترین کیفیت در نمونه خون با روش نمک زدن (1.74) و کمترین کیفیت در تمام نمونه های مورد بررسی با روش جوشاندن حاصل شد و در مورد اکثر نمونه ها روش نمک زدن و فنل کلروفرم dna کیفیت مشابهی داشت. در مورد کمیت dna بیشترین کمیت dna استخراج شده در تمام نمونه ها مربوط به روش جوشاندن بود (μg/ml 6.7) و فقط در مورد نمونه اسلاید رنگ نشده بیشترین کمیت مربوط به روش فنل –کلروفرم بود .در حالیکه در برخی نمونه ها روش فنل –کلروفرم و در برخی دیگر روش نمک زدن کمترین کمیت dna استخراجی را داشتند. در مورد وضعیت pcr یا بازدهی dna استخراج شده نمونه خون با هر سه روش 100% بازدهی را داشت. در حالیکه در نمونه های دیگر اسلاید مغز استخوان آرشیوی، اسلاید خون محیطی رنگ شده آرشیوی، اسلاید خون محیطی رنگ شده تازه و اسلاید خون محیطی رنگ نشده تازه بهترین بازدهی مربوط به روش جوشاندن بود (100%، 88%، 84%، 72%).

نتیجه گیری: تحقیق حاضر نشان داد که استخراج dna از نمونه های اسلایدهای مختلف به غیر از نمونه اسلاید خون محیطی رنگ نشده، نتایج خیلی مطلوبی دارد و ذخیره سازی اسلاید خون محیطی رنگ شده تأثیری در نتیجه استخراج dna نخواهد داشت که این نتیجه برای مطالعات بعدی حائز اهمیت است.