تشخیص سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس با استفاده از روش اسپولیگوتایپنگ در بیماران مراجعه کننده به بیمارستان مسیح دانشوری

زمینه و هدف: هدف از این مقاله شناسایی و تمایز الگوی ژنتیکی سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس بیماران مسلول با استفاده از پلی مرفیسم dr (direct repeat) با روش اسپولیگوتایپینگ می باشد. روش بررسی: کشت مثبت متعلق به 238 بیمار مبتلا به سل ریوی از نظر اسپولیگوتایپینگ مورد بررسی قرار گرفت. جداسازی اولیه ی سویه های مایکوباکتریوم با روش پتروف 4 درصد و با استفاده از محیط جنسون lowenstein jensen (lj) انجام شد و برای شناسایی سویه ها از آزمایشات بیوشیمیایی از قبیل، نیاسین، فعالیت کاتالاز، احیای نیترات استفاده شد. حساسیت دارویی در برابر ایزونیازید (0.2 میکروگرم در میلی لیتر)، ریفامپین (40 میکروگرم در میلی لیتر، استرپتومایسین (10 میکروگرم در میلی لیتر) و اتامبوتول (2 میکروگرم در میلی لیتر) به روش تناسبی انجام و سویه های به سه گروه حساس، mdr و غیر mdr تقسیم شدند. سپس dna از کلنی های مثبت با روش ctab استخراج گردید. قطعات مورد نظر با روش pcr تکثیر شده و پس از دناتوره کردن قطعه ی تکثیر شده، عمل هیبریداسیون با آنزیم استراپتاویدین پراکسیداز به روش line reverse blot صورت گرفت. با اضافه کردن مقداری لومینانس و قرار دادن غشاء بر روی فیلم x-ray، رادیوگرافی انجام گردید. یافته ها: سویه ها به 9 دسته (beijing, haarlem, u, t1, t2, eai2 eai3, casi, case2) متمایز شدند، که بیشترین تعداد مربوط به سویه ی 27) haarlem درصد، 66.238) و25) casi  درصد، 60.238) می باشد. همچنین با این روش دو سویه ی متعلق به مایکوباکتریوم بویس شناسایی شد. نتیجه گیری: این روش سریع، ساده و دارای حساسیت بالا برای تمایز سویه های مایکوباکتریوم توبرکوزیس و مطالعات اپیدمیولوژی می باشد.