محبوبترین نویسندگان :
نویسندگان مقالات پربازدید :
مجله دانشگاه علوم پزشکی ایران
جزئیات رویداد
همایش ، رویداد ، ژورنال
اینستاگرام تی پی بین
حوزه های تحت پوشش رویداد

  • کلونینگ ژن بیان کننده آنتی ژن سطحی sag1)1) توکسوپلاسما گوندی و ترانسفورماسیون آن در دو سویه tg1 ,dh5a اشرشیاکلی

    نویسندگان :
    کلمات کلیدی :
    جزئیات بیشتر مقاله
    • تاریخ ارائه: 1387/01/01
    • تاریخ انتشار در تی پی بین: 1387/01/01
    • تعداد بازدید: 655
    • تعداد پرسش و پاسخ ها: 0
    • شماره تماس دبیرخانه رویداد: -
     زمینه و هدف: بیماری توکسوپلاسموزیس توسط تک یاخته انگلی به نام توکسوپلاسماگوندی (toxoplasma gondii) ایجاد می شود (surface antigen 1)sag1، آنتی ژن اختصاصی  مرحله ای است که فقط در مرحله تاکی زوئیت وجود دارد و در مراحل اسپوروزئیت و برادی زوئیت وجود ندارد و به مقدار فراوان و به طور یکنواخت بر روی سطح داخل و خارج سلولی تاکی زوئیت ها توزیع شده است. این آنتی ژن دارای دو گلیکوفرم است و آنتی ژن، کاملاً conformational است. ژن کد کننده sag1، به صورت single copy بوده و هیچ اینترونی ندارد. sag1، ایمونوژنیک ترین ساختار تاکی زوئیت t.gondii است و به همین خاطر در چندین روش تشخیصی و برای تهیه واکسن نوترکیب و زیر واحدی علیه بیماری توکسوپلاسموزیس، استفاده شده و مورد توجه بوده است. هدف از این مطالعه، کلون کردن قطعه sag1 در پلاسمید ptz57r و ترانسفورم کردن پلاسمید نوترکیب در سویه های tg ,dh5α باکتری های e.coli می باشد.

    روش بررسی: این تحقیق یک مطالعه تجربی می باشد. برای این کار، ابتدا انگل توکسوپلاسما در صفاق موش سوری تکثیر داده و آنگاه انگل با (phosphate buffered saline)pbs شستشو داده شد. جهت تهیه و نگهداری انگل، از موش سوری ماده استفاده شد. (deoxyribonucleic acid)dna ژنومی توکسوپلاسما، با روش فنل-کلر فرم، استخراج شده، سپس با کمک پرایمرهای اختصاصی ویژه ژن sag1، ژن مورد نظر با روش (polymrase chain reaction)pcr تکثیر شد و با استفاده از ژل آگاروز، محصول pcr، الکتروفورز شده و اندازه ژن تکثیر شده با استفاده از مارکر تعیین شد. محصول pcr با استفاده از کیت تجارتی، خالص شده و سپس به کمک آنزیم t4dna ligase، محصول pcr به داخل یک کلونینگ وکتور کلون شد. در نهایت پلاسمید نوترکیب به داخل سلول های مستعد e.coli دو سوش dh5α, tg ترانسفورم شد.  

سوال خود را در مورد این مقاله مطرح نمایید :

با انتخاب دکمه ثبت پرسش، موافقت خود را با قوانین انتشار محتوا در وبسایت تی پی بین اعلام می کنم
مقالات جدیدترین رویدادها
مقالات جدیدترین ژورنال ها