-
بیان ژن و تخلیص آنزیم لوسیفراز و سنجش atp سلولی
جزئیات بیشتر مقاله- تاریخ ارائه: 1392/07/24
- تاریخ انتشار در تی پی بین: 1392/07/24
- تعداد بازدید: 3336
- تعداد پرسش و پاسخ ها: 0
- شماره تماس دبیرخانه رویداد: -
لوسیفراز آنزیم کلیدی نشر نور در موجودات نورافشان می باشد. این آنزیم واکنش نشر نور را با استفاده از سوبستراهای لوسیفرین و atp انجام می دهد. در این مطالعه بیان ژن و تخلیص آنزیم لوسیفراز از حشره شبتاب گونه ایرانی lampyris turkestanicus و راه اندازی سنجش atp سلولی انجام شد. cdna کد کننده لوسیفراز گونه l. turkestanicus از ناقل pqe30 به ناقل بیانی pet28a منتقل و ناقل نوترکیب بیانی pltu28a ساخته شد. این ناقل در باکتری e.coli سویه xllblue بیان و تخلیص لوسیفراز نوترکیب با استفاده از ستون نیکل سفارز و در یک مرحله انجام شد. فعالیت آنزیم با استفاده از دستگاه لومینومتر بررسی و مقدار km و vmax آنزیم نسبت به atp اندازه گیری گردید. با استفاده از کیت شرکت پرومگا و روش طراحی شده به کمک آنزیم لوسیفراز و سریال رقت از atp، یک منحنی استاندارد رسم شد. سپس به کمک محیط کشت حاوی باکتری، منحنی سنجش غلظت باکتری ها برای کیت شرکت پرومگا و روش طراحی شده رسم گردید. نتایج این پژوهش نشان می دهد که انتقال cdna کد کننده لوسیفراز l. turkestanicus به داخل وکتور pet28 و ترانسیوم کردن آن به درون باکتری های مستعد به طور کامل انجام شده است. پس از رشد باکتری های نوترکیب، کلونی های مثبت به سهولت و به کمک لوسیفرین انتخاب و کشت داده شد. تصویر ژل sds-page نشان می دهد که تخلیص آنزیم لوسیفراز به کمک رزین نیکل سفاروز با خلوص بالائی انجام شده است. منحنی های استاندارد سنجش atp و سنجش غلظت باکتری های با استفاده از کیت شرکت پرومگا و کیت طراحی شده به کمک آنزیم لوسیفراز نشان دهنده همسانی بالای این دو روش در تشخیص میزان atp می باشند. مطالعه منحنی های حاصل از سنجش atp و سنجش غلظت باکتری ها در مورد کیت پرومگا با کیت طراحی شده نشان دهنده کیفیت بالای کیت طراحی شده و قابلیت آن در سنجش atp و استفاده های دیگر از این کیت را تایید می کند.
مقالات جدیدترین رویدادها
-
استفاده از تحلیل اهمیت-عملکرد در ارائه الگوی مدیریت خلاقیت سازمانی و ارائه راهکار جهت بهبود
-
بررسی تاثیر ارزش وجوه نقد مازاد بر ساختار سرمایه شرکت های پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران
-
بررسی تأثیر سطح افشای ریسک بر قرارداد بدهی شرکت های پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران
-
بررسی تأثیر رتبه بندی اعتباری مبتنی بر مدل امتیاز بازار نوظهور بر نقد شوندگی سهام با تأکید بر خصوصی سازی شرکت ها
-
تأثیر آمیخته بازاریابی پوشاک ایرانی بر تصویر ذهنی مشتری پوشاک ایرانی (هاکوپیان)
-
استنشاق دود سیگار محیطی در دوران بارداری و پیامدهای زایمانی در زنان باردار مراجعه کننده به زایشگاه نیک نفس رفسنجان در سال 1387
-
شناخت حکمت هنر اسلامی، ضامن فهم و بقای آن…
-
نقش اعداد مقدس در معماری اسلامی
-
بررسی تأثیر مقدار رطوبت درعمل آوری بر مقاومت فشاری 28 روزه بتن
-
بررسی عوامل موثر بر میزان الگوپذیری دانش آموزان مقطع متوسطه دوره اول از همکلاسان خود
مقالات جدیدترین ژورنال ها
-
مدیریت و بررسی افسردگی دانش آموزان دختر مقطع متوسطه دوم در دروان کرونا در شهرستان دزفول
-
مدیریت و بررسی خرد سیاسی در اندیشه ی فردوسی در ادب ایران
-
واکاوی و مدیریت توصیفی قلمدان(جاکلیدی)ضریح در موزه آستان قدس رضوی
-
بررسی تاثیر خلاقیت، دانش و انگیزه کارکنان بر پیشنهادات نوآورانه کارکنان ( مورد مطالعه: هتل های 3 و 4 ستاره استان کرمان)
-
بررسی تاثیر کیفیت سیستم های اطلاعاتی بر تصمیم گیری موفق در شرکتهای تولیدی استان اصفهان (مورد مطالعه: مدیران شرکتهای تولیدی استان اصفهان)
-
بررسی جایگاه سوگند در فقه امامیه
-
شناخت مرجع قضایی صالح در منازعات ناشی از مسئولیت مدنی
-
بررسی تأثیر روش های تأمین مالی بر سیاست تقسیم سود در شرکت های پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران
-
مقایسه هوش معنوی و خودپنداره، در دانش آموزان دختر نابینا و بینای دوره متوسطه دوم شهر تهران
-
the influence of replacing sand with waste glass particle on the physical and mechanical parameters of concrete
سوال خود را در مورد این مقاله مطرح نمایید :