-
تخلیص و بررسی خصوصیات مولکولی پارااکسوناز سرم انسان
جزئیات بیشتر مقاله- تاریخ ارائه: 1395/06/17
- تاریخ انتشار در تی پی بین: 1395/06/17
- تعداد بازدید: 552
- تعداد پرسش و پاسخ ها: 0
- شماره تماس دبیرخانه رویداد: -
هدف: هدف تخلیص پاراکسوناز -1 سرم انسان که به نظر می رسد یکی از آنزیم های موثر در خنثی سازی مواد ارگانوفسفات است، می باشد.
روش بررسی: در این تحقیق دو نوع ستون کروماتوگرافی تعویض آنیونی (deae sephadex a-50) غربال مولکولی (sephadex g-200) برای تخلیص این آنزیم مناسب شناخته شد. با استفاده از دترجنت غیریونی، آنزیم از ساختار لیپوپروتئین hdl جدا گردید. پس از اتصال آنزیم به ستون تعویض یون با شستشوی متناوب پروئین های ناخواسته و غیرمتصل از ستون خارج گردید. آنزیم مورد نظر با استفاده از شیب غلظتی از کلریدسدیم خارج و فراکسیون های فعال جمع و بر روی ستون غربال مولکولی برده شد. فراکسیون های فعال خارج شده از این ستون مجددا بر روی ستون تازه تهیه شده از میدیای ستون اول (deae sephadex a-50) برده شد. با این تفاوت که هم بافر تغییر یافته بود و هم ph بافر شستشو نسبت به مرحله اول کاهش یافته بود.
یافته ها: نتایج نشان داد که حاصل تخلیص این روش کروماتوگرافی، آنزیم با درصد خلوص بیش از 95% و فعالیت ویژه 320 واحد بین المللی در میلی گرم پروتئین است. با استفاده از ژل پلی آکریل آمید (sds-page) تنها یک باند پروتئینی در محدوده 43 کیلودالتون مشاهده شد. بررسی مطالعات سینیتیکی نشان داد میل ترکیبی آنزیم با سوبستراهای مختلف وابسته به بافر و یون کلسیم و سدیم است. چنان که با استفاده از سوبسترای پارااکسون هیدرولیز پارااکسون توسط آنزیم تخلیص شده وابسته به کلسیم و کلرید سدیم بود (km = 1.39 ± 0.52). در صورتیکه هیدرولیز فنیل استات نیاز به کلرید سدیم و کلسیم نداشت (km = 0.728 ± 0.105). حداکثر فعالیت آنزیم برای هیدرولیز پارااکسون در محدوده ph برابر 11-9.5 و برای فنیل استات در محدوده 8.5-8 بود. گلیسرول 20% (حجمی-حجمی) بهترین پایدار کننده در دمای 25 درجه سانتی گراد شناخته شد. بطوری که پس از مدت 20 روز در این دما بیش از 75% فعالیت اولیه آنزیم باقی بود. بر عکس در دمای 56 درجه سانتی گراد سولفات آمونیوم عملکرد بهتری را نشان داد. آنزیم تخلیص شده توسط غلظت های میکرومولار edta و یون روی (zn2+) مهار گردید. غلظت های مهاری 50 درصدی (ic50) در حضور کلسیم برای هر دو مهار کننده افزایش یافت.
نتیجه گیری: روش بکار رفته ارزان و سریع است بطوری که می توان با استفاده از این روش مقدار زیادی از این آنزیم را تخلیص و آلودگی و مسمویت با ارگانو فسفات ها را از بین برد.
مقالات جدیدترین رویدادها
-
استفاده از تحلیل اهمیت-عملکرد در ارائه الگوی مدیریت خلاقیت سازمانی و ارائه راهکار جهت بهبود
-
بررسی تاثیر ارزش وجوه نقد مازاد بر ساختار سرمایه شرکت های پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران
-
بررسی تأثیر سطح افشای ریسک بر قرارداد بدهی شرکت های پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران
-
بررسی تأثیر رتبه بندی اعتباری مبتنی بر مدل امتیاز بازار نوظهور بر نقد شوندگی سهام با تأکید بر خصوصی سازی شرکت ها
-
تأثیر آمیخته بازاریابی پوشاک ایرانی بر تصویر ذهنی مشتری پوشاک ایرانی (هاکوپیان)
-
میزان آگاهی دانشجویان دانشگاه علوم پزشکی اراک از احکام پزشکی قبل و بعد از آموزش 85-1384
-
تحلیل ضرورت و بررسی تکامل مدل های تلفیقی مدیریت ریسک و مدیریت ارزش
-
بررسی رابطه رفتارهای شهروند سازمانی و رفتارهای کاری مخرب کارکنان شهرداری بروجرد
-
بهینه سازی طراحی سازه های فضاکار با استفاده از الگوریتم جستجوی افشان و مقایسه با عملکرد الگوریتم ژنتیک
-
thermoelectric properties of high-doped silicon from room temperature to 900 k
مقالات جدیدترین ژورنال ها
-
مدیریت و بررسی افسردگی دانش آموزان دختر مقطع متوسطه دوم در دروان کرونا در شهرستان دزفول
-
مدیریت و بررسی خرد سیاسی در اندیشه ی فردوسی در ادب ایران
-
واکاوی و مدیریت توصیفی قلمدان(جاکلیدی)ضریح در موزه آستان قدس رضوی
-
بررسی تاثیر خلاقیت، دانش و انگیزه کارکنان بر پیشنهادات نوآورانه کارکنان ( مورد مطالعه: هتل های 3 و 4 ستاره استان کرمان)
-
بررسی تاثیر کیفیت سیستم های اطلاعاتی بر تصمیم گیری موفق در شرکتهای تولیدی استان اصفهان (مورد مطالعه: مدیران شرکتهای تولیدی استان اصفهان)
-
جستاری به تعاملات فضا، فرهنگ و هویت ایرانی در تقابل با مفاهیم بنیادی معماری ایرانی
-
کودک کار سنتی و مدرن در حقوق موضوعه ایران و کنوانسیون بین المللی حقوق کودک
-
تاثیر بیش اعتمادی مدیران بر اظهارنظر ابهام در تداوم فعالیت در شرکت و تغییر حسابرس
-
بررسی و تحلیل حقوقی افعال زیان بار در فضای مجازی
-
studying the technical effect of carbon nanotube on asphalt mixture with solid granulation
سوال خود را در مورد این مقاله مطرح نمایید :