محبوبترین نویسندگان :
نویسندگان مقالات پربازدید :
مجله علمی پژوهشی دانشگاه علوم پزشکی سمنان
جزئیات رویداد
همایش ، رویداد ، ژورنال
اینستاگرام تی پی بین
حوزه های تحت پوشش رویداد

  • تولید متالوپروتئیناز 63 کیلودالتونی (gp63) لیشمانیاماژور در مخمر متیلوتروف pichia pastoris

    نویسندگان :
    کلمات کلیدی :
    جزئیات بیشتر مقاله
    • تاریخ ارائه: 1387/01/01
    • تاریخ انتشار در تی پی بین: 1387/01/01
    • تعداد بازدید: 518
    • تعداد پرسش و پاسخ ها: 0
    • شماره تماس دبیرخانه رویداد: -
    سابقه و هدف: با توجه به مشکلات ناشی از لیشمانیا به عنوان یک انگل داخل سلولی بیماری زا که بیش از 12 میلیون نفر را در بیش از 86 کشور جهان مبتلا نموده است و در راستای ارزیابی توانایی گلیکوپروتئین 63 کیلودالتونی (gp63) لیشمانیاماژور به عنوان یک ایمنوژن در تحریک سیستم ایمنی میزبان و همچنین آنتی ژن تشخیصی، ژن کد کننده مولکول فوق در وکتور دو میزبانه phil-s1 به منظور بیان آن ژن در مخمر متیلوتروف p.pastoris کلون و بیان گردید و در نهایت خصوصیات مولکول نوترکیب حاصل نیز مورد ارزیابی قرار گرفت.

    مواد و روش ها: ژن تغییر یافته gp63 به گونه ای که فقط پروتئین بالغ را کد نماید، در وکتور دومیزبانه (و همچنین پلاسمید puc19) کلون گردید. مخمر pichia pastoris (سویه های (gs115 ,km71 با پلاسمید دومیزبانه نوترکیب و همچنین با پلاسمید phil-s1 (به تنهایی) ترانسفورم گردید. کلون های ترانسفورم شده در محیط فاقد هیستیدین انتخاب شدند، dna کروموزومی ترانسفورمنت ها تخلیص گردید و با روش های sourthen ,pcr ,blotting (s. b.) وارد شدن زن فوق در کروموزوم مخمر نوترکیب مورد ارزیابی قرار گرفت. ترانسفورمنت های تایید شده، در محیط حاوی گلیسرول bmgy، تا حصول کدورت od600=6 کشت و سپس جهت بیان ژن هترولوگ فوق به محیط حاوی متانول، bmmy، انتقال داده شدند. با افزودن متانول به صورت روزانه، حالت القاء در آنان حفظ گردید. با تخلیص rna و انجام northen blotting صحت نسخه برداری و همچنین بیان ژن فوق (تولید پروتئین نووترکیب) با ژل sds-page 12%، وسترن بلاتینگ، و ifa مورد ارزیابی قرار گرفت.

سوال خود را در مورد این مقاله مطرح نمایید :

با انتخاب دکمه ثبت پرسش، موافقت خود را با قوانین انتشار محتوا در وبسایت تی پی بین اعلام می کنم
مقالات جدیدترین رویدادها
مقالات جدیدترین ژورنال ها