-
بررسی خصوصیات ایمنی زایی پروتئین نوترکیب زنجیره ی سبک سم بوتولینم تیپ (840a)
جزئیات بیشتر مقاله- تاریخ ارائه: 1390/01/01
- تاریخ انتشار در تی پی بین: 1390/01/01
- تعداد بازدید: 671
- تعداد پرسش و پاسخ ها: 0
- شماره تماس دبیرخانه رویداد: -
زمینه و هدف: سم بوتولینوم تیپ a به لحاظ ساختاری از یک زنجیره ی سبک به وزن 50 کیلودالتون و یک زنجیره ی سنگین به وزن 100 کیلودالتون تشکیل شده است که توسط یک باند دی سولفید به هم متصل شده اند. این پروتئین شامل سه بخش (domain) است که بخش زنجیره ی سبک آن دارای فعالیت آنزیمی می باشد. در این پژوهش، هدف ما از تولید نوترکیب بخش عملکردی به دست آوردن یک پروتئین مناسب جهت بررسی ایمنی زایی آن است.روش بررسی: باکتری در شرایط بی هوازی رشد داده شد سپس dna کروموزومی به روش قلیایی استخراج گردید. پس از بررسی ترادف ژن مربوطه و طراحی پرایمر قطعه ی مورد نظر از طریق واکنش های زنجیره ای پلیمرازی (pcr) فراوان سازی شد. محصول pcr بر روی سه ناقل بیانی pet32α ,pet28α ,prseta همسانه سازی گردید. پروتئین حاصل از بیان توسط sds-page بررسی و صحت محصول با روش وسترن بلاتینگ و واکنش الیزا مورد تایید نهایی قرار گرفت و سپس به وسیله ی کروماتوگرافی میل ترکیبی خالص سازی شد، ایمنی زایی بر روی موش سوری در سه مرحله صورت گرفت و نتایج آن مورد بررسی قرار گرفت.
یافته ها: در این تحقیق بالاترین بیان در شرایط غلظت 0.5 میلی مولار iptg، جذب نوری 0.6 و زمان القای 15 ساعت در دمای 30 درجه ی سانتی گراد به دست آمد. پروتئین بیان شده توسط ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی خالص سازی گردید. آنتی بادی حاصل از تزریق پروتئین نوترکیب توانست مانع از مرگ موش ها در دوز 100 ld50 شود.
نتیجه گیری: هر چند بیان ژن هایی با درصد بالایی از at در سیستم ecoli ضعیف می باشد ولی ما در این تحقیق توانستیم بیان مناسبی به دست آوریم. تخلیص پروتئین نوترکیب در مراحل اولیه به دلیل اتصال ضعیف هیستیدین انتهایی به ستون دشوار بوده که با تغییر در روش ها این پروتئین تا 90 درصد خالص سازی شد. در بحث ایمنی زایی پروتئین نوترکیب موردنظر نیز مشخص شد که آنتی بادی های تولید شده در مقایسه با آنتی بادی تولید شده علیه بخش اتصال دهنده از ایمنی زایی پایینی برخوردار است.
حوزه های تحت پوشش رویداد
مقالات جدیدترین رویدادها
-
استفاده از تحلیل اهمیت-عملکرد در ارائه الگوی مدیریت خلاقیت سازمانی و ارائه راهکار جهت بهبود
-
بررسی تاثیر ارزش وجوه نقد مازاد بر ساختار سرمایه شرکت های پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران
-
بررسی تأثیر سطح افشای ریسک بر قرارداد بدهی شرکت های پذیرفته شده در بورس اوراق بهادار تهران
-
بررسی تأثیر رتبه بندی اعتباری مبتنی بر مدل امتیاز بازار نوظهور بر نقد شوندگی سهام با تأکید بر خصوصی سازی شرکت ها
-
تأثیر آمیخته بازاریابی پوشاک ایرانی بر تصویر ذهنی مشتری پوشاک ایرانی (هاکوپیان)
-
مطالعه ای بر روی رفتار دینامیکی صفحات rcc و sfrc با استفاده از روش اجزاء محدود
-
تاثیر عوامل محیطی در رشد کیفی آموزش کودکان (نمونه موردی: حیاط مدرسه دروازه ی علم)
-
تاثیر درمان شفقت به خود بر کمال گرایی ناسازگار و انتقاد از خود
-
آنالیز غیرخطی رفتار اتصالات در سازه های پیش ساخته متشکل از پانلهای بزرگ
-
بررسی و تحلیل کاهش مصرف انرژی به کمک ict در ارائه خدمات درمانی به بیماران
مقالات جدیدترین ژورنال ها
-
مدیریت و بررسی افسردگی دانش آموزان دختر مقطع متوسطه دوم در دروان کرونا در شهرستان دزفول
-
مدیریت و بررسی خرد سیاسی در اندیشه ی فردوسی در ادب ایران
-
واکاوی و مدیریت توصیفی قلمدان(جاکلیدی)ضریح در موزه آستان قدس رضوی
-
بررسی تاثیر خلاقیت، دانش و انگیزه کارکنان بر پیشنهادات نوآورانه کارکنان ( مورد مطالعه: هتل های 3 و 4 ستاره استان کرمان)
-
بررسی تاثیر کیفیت سیستم های اطلاعاتی بر تصمیم گیری موفق در شرکتهای تولیدی استان اصفهان (مورد مطالعه: مدیران شرکتهای تولیدی استان اصفهان)
-
بررسی اثرگذاری معماری زیست گرا بر شکل گیری گفتمان نوین معماری
-
برنامه ریزی توسعه فیدر در سیستم های توزیع تحت عدم قطعیت بار
-
بهینه کاوی فرآیند آموزش در سازمان ها
-
بررسی اثربخشی آموزش مبتنی بر ابرها در محیط یادگیری مودل برماندگاری یادگیری و پیشرفت تحصیلی و سازگاری اجتماعی دانش آموزان شهر دهلران از دیدگاه معلمان
-
firefly algorithm based on fuzzy mechanism for optimal congestion management
سوال خود را در مورد این مقاله مطرح نمایید :